خدمات کشت سلول:
- فروش ردههای سلولی:
برای انجام هر تست کشت سلولی، استفاده از ردههای سلولی استاندارد ضروری است. این ردهها توسط انستیتوهای معتبر استخراج و تولید میشوند و ویژگیهای آنها شامل خصوصیات مورفولوژیک، کاریوتایپ، ایزوآنزیمها، سرعت رشد و محیط کشت مورد نیاز مشخص میشود.
- کشت رده سلول:
در هر پروژه سلولی، کشت رده سلولی مورد نظر باید با دقت انجام شود. سلولهایی که در حالت فریز به سر میبرند یا به تازگی دیفرانسیه شدهاند، مناسب برای کار نیستند. این سلولها باید در شرایط استاندارد با محیط کشت مناسب کشت شده و به فاز لگاریتمی رشد برسند.
- تکثیر و نگهداری طولانیمدت ردههای سلول حیوانی:
ردههای سلولی ارزشمند باید پس از پایان پروژه به شکل فریز درآمده و در دمای منفی ۱۹۶ درجه سانتیگراد نگهداری شوند. بنابراین بانک سلولی، سلولهای ارزشمند محققان و دانشجویان را به خوبی پذیرایی میکند و در صورت نیاز آنها را به شکل طولانیمدت نگهداری میکند. این نگهداری شامل حفظ سلول در تانک استاندارد ازت مایع میشود که در فواصل منظم میزان ازت آن شارژ شده و دمای آن تحت هیچ شرایطی پایینتر از منفی ۱۷۸ نمیرود.
- بررسی زندهمانی (Viability) و شمارش سلولی:
قبل از هر پروژه، سلولهای مورد استفاده بررسی شده و سپس در تعداد مناسب در ظروف مختلف کشت میشوند. این بررسی شامل بررسی زندهمانی و تعداد سلولها میشود تا در شروع پروژه اطمینان کامل از سلامت و زندهمانی آنها حاصل شود.
- تست MTT:
تیمار سلولها با انواع داروها و بررسی سمیت مواد (MTT, XTT, LDH Assays) از جمله تستهای اصلی در سیستمهای in-vitro است که برای بررسی سمیت داروهای مختلف بر سلولهای جانوری استفاده میشود. آزمایشگاه تستهای سمیتسنجی برای انواع داروها را انجام میدهد، از جمله مواد محلول، جامد و پلاسما. تستهای سمیتسنجی برای مواد جامد نیز به صورت مستقیم و غیرمستقیم انجام میشود.
ترنسفکشن سلولها با DNA و انواع RNA:
مهندسی ژنتیک سلولهای جانوری از جمله چالشهای اساسی در زمینهی تحقیقات است. ورود اسیدهای نوکلئیک به داخل سلولهای یوکاریوتی نیازمند شرایط ویژهای است که ژنیران تمام این شرایط را مهیا کرده و با استفاده از کیتهای تولید داخلی و خارجی (لیپوفکتامین)، ترنسفکشن را با موفقیت به انجام میرساند. همچنین، تستهای پاییندست بررسی موفقیت ترنسفکشن در ژنیران قابل انجام است. این تستها شامل بررسی موفقیت با استفاده از GFP، فلوسایتومتری و Real-Time PCR میشود.
تستهای تهاجم و مهاجرت سلولی:
بررسی تهاجم سلولی برای تشخیص توانایی متاستاز و بررسی مهاجرت سلولی برای تشخیص توانایی ترمیم بافتی از اهمیت بالایی در تحقیقات برخوردار است. تست مهاجرت سلولی با استفاده از روش خراش (Scratch) یا Wound Healing انجام میشود. در این تست، سلولها در تراکم بالا خراش داده شده و حرکت آنها در سطح دوبعدی مورد بررسی قرار میگیرد. همچنین، تست تهاجم سلولی با استفاده از روش Boyden Chamber و پلیتهای Transwell انجام میشود و تهاجم سلولی در فضای سهبعدی ماتریژل و عبور از ممبران مورد بررسی قرار میگیرد.
کشت سلول اولیه (Primary Cell Culture):
استخراج و کشت سلول از بافت مورد نظر یکی از روشهای اصلی در زمینهی تحقیقات است. در این فرآیند، تهیه سلولهایی عاری از هرگونه آلودگی خارجی میکروبی و داخلی از جمله چالشهای اصلی است. آزمایشگاه ها سلولهای مختلف را از بافتهای حیوانی و انسانی استخراج کرده و پس از انجام تستهای تأییدی، سلول را در تراکم بالا و بدون هرگونه آلودگی به پژوهشگران تحویل میدهد.
کشت سلولهای بنیادی و بررسی تمایز آنها:
سلولهای بنیادی به دلیل توانایی تمایز به انواع سلولهای مختلف از اهمیت بالایی در پزشکی برخوردار هستند. آزمایشگاه ها امکان استخراج سلولهای بنیادی جنینی و بالغ را فراهم کرده اند. این سلولها عاری از هرگونه آلودگی کشت داده میشوند و تحت عنوان سلولهای بنیادی مزانشیمی و سلولهای بنیادی جنینی مورد استفاده قرار میگیرند.
نامیرا کردن سلولها:
بسیاری از سلولهای نرمال، با القای تغییرات ژنتیکی جزئی، قابلیت نامیرایی و تحمل بلندمدت در محیط کشت را پیدا میکنند. در شرایطی که نیاز به استفاده مداوم یک نوع خاص سلول در مطالعات مختلف وجود دارد و آن سلول قابلیت تقسیم بالایی ندارد، نامیرایی آن سلولها میتواند منجر به ایجاد یک ردهی با قابلیت تحمل پاساژ بالا و ثابتی در زمان باشد. آزمایشگاه ها با استفاده از ویروسهای مختلف، خدمات نامیرایی برخی از سلولها را ارائه میدهد.
استخراج سلولهای اولیه از بافت:
کشت اولیه، یکی از روشهای مهم در سیستم کشت سلولی است که در آن سلولها به طور مستقیم از بافت بدست میآیند. در سازماندهی بافتها، سلولها دارای اتصالات غشایی و پیوندهای سلول-سلولی هستند که باید ابتدا این پیوندها حذف شوند. برای این منظور از روشهای جداسازی سلولی مانند هضم آنزیمی یا شیمیایی با استفاده از آنزیمهای پروتئولیتیک مانند تریپسین یا کلاژناز و روشهای جداسازی مکانیکی مانند تقسیم بافت با چاقوهای جراحی استفاده میشود.
بررسی میزان آپوپتوز و نکروز به روش رنگآمیزی AO/PI:
یکی از روشهای قابل اعتماد در ارزیابی سمیت سلولی، بررسی میزان آپوپتوز و نکروز است که با استفاده از رنگآمیزی فلورسنت قابل انجام است. بخش کشت سلولی ژنیران این خدمات را با کیفیت بسیار بالا ارائه میدهد. پس از تیمار سلولها با داروهای مختلف، آنها را با رنگهای آکریدین اورنج و پروپیدیوم یدید رنگآمیزی کرده و عکسهای با کیفیتی را با استفاده از فیلترهای مختلف میکروسکوپ فلورسنت تهیه میکند. سپس با تلفیق این عکسها، میزان آپوپتوز و نکروز سلولی تعیین میشود.
با راشا زیست همراه باشید…